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Nox5双切口酶质粒(h) | sc-401223-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nox5双切口酶质粒(h2) | sc-401223-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOX5 编码 Nox5,这是一种由钙激活的 NADPH 氧化酶,可在人体细胞中生成作为信号中间体的活性氧(ROS)。Nox5 通过将细胞内 Ca2+ 动态与受调控的超氧阴离子和过氧化氢生成相耦联,影响多种氧化还原敏感通路,包括 MAPK、NF-κB,以及对离子通道的调节和细胞骨架重塑。Nox5 来源的 ROS 参与调控细胞增殖、迁移和炎症反应;其失调与氧化应激相关表型有关,并与心血管与代谢生物学中的相关过程密切相关。Nox5 的活性常在内皮与平滑肌信号传导、免疫调控以及氧化还原依赖的转录程序等背景下被研究。
Nox5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NOX5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NOX5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NOX5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NOX5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。