Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-418958

概要

Chrnb2 は、神経型ニコチン性アセチルコリン受容体（nAChR）の β2 サブユニットをコードしています。nAChR は、5量体からなるリガンド作動性陽イオンチャネルで、迅速なコリン作動性神経伝達を担います。β2 を含む nAChR は膜の脱分極と Ca²⁺流入を調節し、注意・報酬・覚醒に関連する経路において、シナプス可塑性、神経伝達物質放出、回路の興奮性を形成します。これらのイオノトロピックなシグナル伝達を介して、CHRNB2 は活動依存的な遺伝子発現や、その下流にある MAPK/CREB 関連過程に影響を与えます。β2 含有 nAChR の遺伝学的／機能的な攪乱は、神経行動学的表現型や発作関連メカニズムとの関連が報告されており、Chrnb2 は神経疾患の病態生物学におけるコリン作動性の寄与をモデル化するうえで重要な標的となります。

Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるChrnb2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Chrnb2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Chrnb2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Chrnb2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2の機能に不可欠なChrnb2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Chrnb2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Chrnb2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 HDRプラスミド（m）および Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはChrnb2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のChrnb2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。