NFRκB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433432
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NFRκB O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NFRκB, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NFRκB Anticorpo (A-12): sc-514977
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NFRκB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433432 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Nfrkb** de camundongo codifica o **NFRκB**, um fator nuclear associado à cromatina relacionada ao **NF-κB** e à regulação transcricional, capaz de influenciar programas de expressão gênica responsivos a estímulos. O NFRκB tem sido associado a complexos proteicos nucleares implicados em processos dependentes de DNA, incluindo o controle da transcrição e a manutenção da estabilidade do genoma. Ao modular a expressão específica do contexto de genes inflamatórios e de resposta ao estresse, **Nfrkb** pode moldar vias que governam a proliferação, a diferenciação e a sobrevivência celular. A desregulação de redes regulatórias adjacentes ao NF-κB é frequentemente investigada em disfunções imunes, fenótipos inflamatórios e estados transcricionais relevantes para o câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NFRκB (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nfrkb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nfrkb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nfrkb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NFRκB.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nfrkb para a investigação da sinalização de NFRκB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nfrkb críticos para a função NFRκB
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nfrkb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NFRκB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NFRκB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nfrkb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NFRκB Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NFRκB (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nfrkb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nfrkb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.