Neuronatin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421919

Visão geral

O gene **Nnat** de camundongo codifica a **neuronatina**, uma pequena proteína imprintada, regulada ao longo do desenvolvimento, enriquecida no sistema nervoso e em tecidos endócrinos. A neuronatina localiza-se predominantemente na membrana do retículo endoplasmático e está implicada no controle da dinâmica do cálcio intracelular, da homeostase do RE e no acoplamento de sinais metabólicos a decisões sobre o estado celular. Por meio de efeitos na sinalização dependente de Ca²⁺ e em vias responsivas ao estresse, a neuronatina tem sido associada à diferenciação neuronal, à função sináptica, à biologia de adipócitos e de células β pancreáticas e à regulação do balanço energético. A expressão desregulada de **NNAT** foi relatada em contextos de disfunção metabólica, fenótipos do neurodesenvolvimento e programas celulares associados a tumores, tornando **Nnat** um alvo útil para estudos mecanísticos do desenvolvimento e das respostas celulares ao estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Neuronatin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nnat em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nnat, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nnat na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Neuronatin.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nnat para a investigação da sinalização de Neuronatin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nnat críticos para a função Neuronatin
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nnat para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Neuronatin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Neuronatin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nnat. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Neuronatin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Neuronatin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nnat para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nnat definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.