neuroligin 2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402250

Descripción general

NLGN2 codifica la neuroligina 2, una molécula postsináptica de adhesión celular enriquecida en sinapsis inhibitorias, donde se une a neurexinas presinápticas para organizar la formación y la maduración de la sinapsis. La neuroligina 2 actúa como andamiaje de la especialización postsináptica GABAérgica al coordinar el agrupamiento de receptores, la señalización sináptica y la organización del citoesqueleto, influyendo en el equilibrio excitación–inhibición y en la sincronía de la red. A través de su papel en la sinaptogénesis y la plasticidad sináptica, NLGN2 se cruza con vías que regulan la conectividad neuronal y la neurotransmisión inhibitoria. Se ha implicado la alteración de la función o la expresión de NLGN2 en fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos asociados con una alteración del desarrollo de los circuitos inhibitorios.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO neuroligin 2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NLGN2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NLGN2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NLGN2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína neuroligin 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NLGN2 para la investigación de la señalización de neuroligin 2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NLGN2 críticos para la función de neuroligin 2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NLGN2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido neuroligin 2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido neuroligin 2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NLGN2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR neuroligin 2 (h) y el plásmido HDR neuroligin 2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NLGN2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NLGN2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.