netrin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421980-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- netrin-1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase netrin-1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase netrin-1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ntn1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
netrin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421980-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Ntn1 de camundongo codifica a netrina-1, uma molécula guia secretada relacionada à laminina que orienta o trajeto dos axônios, a migração neuronal e a padronização de tecidos durante o desenvolvimento. A netrina-1 sinaliza por meio de receptores como DCC e membros da família UNC5 para regular a dinâmica do citoesqueleto, a adesão e a motilidade direcional, e pode modular processos de sobrevivência e associados a barreiras, dependendo do contexto celular. Além do sistema nervoso, a netrina-1 contribui para programas de angiogênese e de tráfego de células imunes, conectando sinais extracelulares de orientação à organização do microambiente. A desregulação da sinalização de NTN1 tem sido associada a alterações na conectividade neurodesenvolvimental e a mecanismos relevantes para inflamação e biologia tumoral, tornando-o um ponto útil para dissecar vias em diversos modelos.
netrin-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ntn1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ntn1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ntn1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ntn1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.