NCX3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-431066-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NCX3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NCX3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase NCX3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Slc8a3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NCX3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-431066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NCX3 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-431066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc8a3 codifica o trocador Na⁺/Ca²⁺ murino NCX3, um transportador da membrana plasmática que ajuda a manter a homeostase intracelular de Ca²⁺ ao acoplar o efluxo de Ca²⁺ (ou o influxo sob condições eletroquímicas específicas) aos gradientes de Na⁺. Ao modular a dinâmica do Ca²⁺ citosólico, o NCX3 influencia o acoplamento excitação–contração, a sinalização sináptica e o manejo de Ca²⁺ pelas mitocôndrias, integrando-se assim a redes mais amplas de sinalização de cálcio que regulam o metabolismo, a excitabilidade de membrana e respostas ao estresse. A atividade do NCX3 é particularmente relevante em tecidos excitáveis onde é necessária uma remoção rápida de Ca²⁺, incluindo neurônios e músculo. A desregulação da troca Na⁺/Ca²⁺ e de vias de sobrecarga de Ca²⁺ tem sido associada a mecanismos de neurodegeneração, respostas a lesão isquêmica e disfunção celular relacionada a miopatias, tornando o Slc8a3 um alvo útil para estudos mecanísticos.
NCX3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Slc8a3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Slc8a3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Slc8a3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Slc8a3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.