Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NCKX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405875
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NCKX5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NCKX5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NCKX5 Anticorpo (A-6): sc-515715
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NCKX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405875 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SLC24A5 codifica a NCKX5, um trocador de sódio/cálcio dependente de potássio que regula a homeostase iónica dos melanossomas e sustenta uma melanogénese adequada em células produtoras de pigmento. Ao modular o fluxo de Ca²⁺ e o equilíbrio iónico no sistema endomembranar, a NCKX5 influencia a síntese de melanina, a maturação dos melanossomas e as vias de deposição de pigmento. A variação genética em SLC24A5 está fortemente associada a diferenças dentro do intervalo normal na pigmentação humana, e a atividade alterada é frequentemente estudada no contexto da biologia dos melanócitos. Como transportador de membrana com papéis no tráfego intracelular e na função de organelos, a NCKX5 oferece um ponto de entrada mecanístico para estudar como o transporte iónico controla programas de pigmentação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NCKX5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC24A5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC24A5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC24A5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NCKX5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC24A5 para a investigação da sinalização de NCKX5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC24A5 críticos para a função NCKX5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC24A5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NCKX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NCKX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC24A5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NCKX5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NCKX5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC24A5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC24A5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.