NCCT CRISPR 质粒 (m)

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- 目标种属：mouse; 用于相应的human产品，查看NCCT CRISPR Plasmids (h)
- CRISPR/Cas9 KO质粒包含源自GeCKO (v2)库的NCCT特异的20nt向导RNA序列
- 对于CRISPR基因敲除，gRNA 序列指导Cas9蛋白诱导基因组DNA中位点特异的双链断裂(DSB)
- 可提供目标特异的基因敲除和激活的CRISPR质粒。请参考下面标签中详细的产品信息
- 除慢病毒激活颗粒外，其他产品均为转染即用型纯化DNA质粒。慢病毒激活颗粒预包被成慢病毒颗粒的形式，适用于难被转染的细胞

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CRISPR/Cas9 KO plasmids, Double Nickase Plasmids and CRISPR/dCas9 Activation plasmids are considered a "Licensed Product" and are to be used in accordance with the Limited License. Click here for details

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基因信息

种属	基因名称	基因ID	染色质位置	亚型（mRNA）即位号码	蛋白质即位号码	OMIM™ 号码
Mouse	Slc12a3	20497	8 C5	XM_017312625, XM_017312626, XM_017312627, NM_001205311, NM_019415	P59158	N/A

介绍

20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
为保证最大敲除效率，NCCT CRISPR/Cas9 敲除质粒 (m) 包含三个质粒，每个质粒都编码Cas9 核酶和 NCCT-特异性20nt向导RNA.
gRNA 序列来源于 GeCKO (v2)文库，指导Cas9蛋白去诱导基因组DNA双链中一个特异位点的断裂。
如果需要筛选Cas9成功诱导双链断裂的细胞，推荐用 NCCT HDR质粒(m) (sc-422972-HDR) 共转染。
关于对照抗体的可用性，请联系技术服务

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介绍

20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
推荐用 NCCT HDR 质粒 (m) 和 NCCT CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) CRISPR/Cas9敲除质粒共转染 (m)
NCCT HDR 质粒 (m) 包含2-3种质粒，每一种都含有一个同源介导的双链DNA修复（HDR）模板，与 NCCT CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 的剪切位点相对应
每个HDR质粒包含两个800个bp同源臂，可特异地结合到相应的Cas9诱导的双链DNA破坏位点附近的基因组DNA
每个HDR质粒中嵌入了一个嘌呤霉素抗性基因，从而能筛选出稳定敲除（KO）细胞，以及一个RFP（红色荧光蛋白）基因，可用于观察验证转染情况
嘌呤霉素抗性基因和红色荧光蛋白基因的两侧是两个LoxP位点，以便与接下来的Cre Vector sc-418923处理

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20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
NCCT 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的NCCT CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
NCCT双切口酶质粒(m2)编码的成对的向导RNA与NCCT双切口酶质粒(m)的编码的向导RNA不同

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20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
NCCT CRISPER激活质粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
NCCT CRISPR 激活质粒 (m)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募

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介绍

200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
NCCT 慢病毒激活颗粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
NCCT慢病毒激活颗粒(m)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
NCCT 慢病毒激活颗粒（m2）中编码的特异目标的 20 nt 向导RNA的gRNA不同于NCCT慢病毒激活颗粒（m）中编码的gRNA

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