NCAM/CD56 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400302-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NCAM/CD56O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NCAM/CD56 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NCAM/CD56 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NCAM1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NCAM/CD56 Anticorpo (123C3): sc-7326
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NCAM/CD56 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400302-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NCAM/CD56 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400302-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NCAM1 codifica a molécula de adesão celular neural NCAM/CD56, uma glicoproteína da superfamília das imunoglobulinas que medeia interações célula–célula e célula–matriz independentes de Ca²⁺. Por meio de ligações homofílicas e heterofílicas, a NCAM/CD56 regula o crescimento de neuritos, o guiamento axonal, a plasticidade sináptica e a migração, podendo sinalizar pelas vias de Fyn/FAK, MAPK/ERK e de remodelação do citoesqueleto. O splicing alternativo e a polissialilação modulam a força adesiva e a motilidade celular dinâmica durante o desenvolvimento e o reparo tecidual. A expressão ou modificação desregulada de NCAM1 está associada a alterações em processos do neurodesenvolvimento e também é usada como marcador funcional na biologia de células NK e em estudos de invasão tumoral e interações imunes.
NCAM/CD56 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NCAM1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NCAM1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NCAM1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NCAM1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.