Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
NBK Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401751-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NBKO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NBK (h) e o Plasmídeo Double Nickase NBK (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BIK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NBK Anticorpo (H-1): sc-365625
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NBK Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401751-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NBK Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401751-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BIK codifica a NBK, um membro pró-apoptótico “apenas BH3” da família BCL-2, que promove a permeabilização da membrana externa mitocondrial ao antagonizar proteínas antiapoptóticas como BCL-2, BCL-XL e MCL1. A NBK atua na interface entre a apoptose intrínseca, a sinalização de estresse do retículo endoplasmático (RE) e a homeostase do cálcio, conectando sinais de estresse à ativação de caspases e à morte celular programada. A regulação da expressão e da degradação de BIK contribui para a sensibilidade celular a danos no DNA, privação de fatores de crescimento e estresse proteotóxico, tornando-o relevante para estudos de sobrevivência de células tumorais e adaptação ao estresse. Alterações na atividade de BIK/NBK também têm sido associadas à homeostase de células imunes e a contextos de remodelamento tecidual, nos quais os limiares de apoptose moldam fenótipos de doença.
NBK O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BIK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BIK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BIK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BIK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.