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N4BP2慢病毒激活颗粒(h) | sc-412585-LAC | 200 µl | $455.00 |
N4BP2(NEDD4 结合蛋白 2)编码一种大型细胞内蛋白,被认为可通过与 NEDD4 家族 E3 泛素连接酶的相互作用,参与泛素依赖性信号传导。已有报道将 N4BP2 的功能与蛋白质周转和胞内转运的调控联系起来,并通过受控的泛素化作用,进一步影响细胞稳态、应激反应以及信号转导网络。在免疫与造血相关背景中,N4BP2 的表达与炎症信号的调节以及 RNA/蛋白质调控过程有关,提示其可能在塑造细胞状态转换中发挥作用。包括 N4BP2 这类与 NEDD4 相互作用的因子在内的泛素通路组分发生失调时,常被用于研究其与肿瘤生物学、神经生物学以及免疫相关疾病机制之间的关联。
N4BP2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 N4BP2 表达。
N4BP2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在N4BP2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性N4BP2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 N4BP2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。