非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
N-Myc 抗体 (NMYC-1): sc-80546. 非转染: sc-117752 (A) 和小鼠 N-Myc 转染: sc-121906 (B) 293T 全细胞裂解液中 N-Myc 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
N-Myc CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-421918
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- N-Myc CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在N-Myc基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：N-Myc: sc-53993，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
N-Myc CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-421918 | 20 µg | $397.00 |
概述
Mycn 编码转录因子 N-Myc。N-Myc 属于 MYC 家族成员，可结合 E-box 基序，从而调控基因表达程序，这些程序在胚胎发育过程中控制细胞周期进程、生物合成代谢、核糖体生物发生以及谱系决定。在小鼠体系中，N-Myc 对神经与间充质祖细胞的扩增至关重要，并能整合来自 PI3K–AKT–mTOR、MAPK 等通路的信号输入，以调节增殖与分化。MYCN 活性失调与致癌转化、染色质状态改变及复制压力密切相关，因此成为肿瘤发生与发育生物学研究中的关键枢纽。N-Myc 依赖的调控网络也与 DNA 损伤应答和细胞凋亡相交汇，使研究者能够从机制层面解析生长控制与细胞命运决策。
N-Myc CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Mycn基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Mycn基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Mycn开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使N-Myc蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Mycn缺失的细胞模型，用于N-Myc信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 N-Myc 功能至关重要的 Mycn 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Mycn 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 N-Myc CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 N-Myc CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Mycn 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 N-Myc HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 N-Myc HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Mycn同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Mycn靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。