Myosin IXa CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-407473

概述

MYO9A 编码肌球蛋白 IXa（myosin IXa），这是一种非经典的、以肌动蛋白为基础的马达蛋白，同时还含有 Rho GTP 酶激活蛋白（RhoGAP）结构域，从而将细胞骨架动力学与小 GTP 酶信号传导联系起来。通过调控肌动蛋白重塑、膜突起形成以及细胞黏附，肌球蛋白 IXa 促进细胞极性与定向迁移，并可影响由 RhoA 介导的通路，从而调控细胞收缩性和细胞连接的组织。上述功能使 MYO9A 成为上皮形态发生、神经突起生长和细胞内运输等过程中的关键机制节点，因为这些过程需要马达活性与 Rho 信号的协同。细胞骨架调控与 Rho 通路信号失衡与多种人类疾病相关，因此 MYO9A 也是研究与疾病相关的运动能力、屏障功能及形态动力学信号变化的一个重要靶点。

Myosin IXa CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中MYO9A基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对MYO9A基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏MYO9A开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Myosin IXa蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建MYO9A缺失的细胞模型，用于Myosin IXa信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 Myosin IXa 功能至关重要的 MYO9A 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 MYO9A 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 Myosin IXa CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Myosin IXa CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 MYO9A 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 Myosin IXa HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Myosin IXa HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由MYO9A同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定MYO9A靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。