Myosin Ia Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436599
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Myosin Ia O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Myosin Ia, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myosin Ia Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-436599 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Myo1a codifica a miosina Ia, um motor baseado em actina enriquecido em células epiteliais polarizadas, nas quais sustenta a estrutura dos microvilos e o acoplamento membrana–citoesqueleto na superfície apical. A miosina Ia contribui para a dinâmica dos filamentos de actina, a tensão de membrana e processos de tráfego vesicular que ajudam a manter a organização da borda em escova e a função de barreira epitelial. Por meio de interações com a rede cortical de actina, influencia vias que regulam a polaridade celular, a absorção e respostas mecânicas no epitélio intestinal. Alterações na função ou na expressão de MYO1A têm sido associadas à desregulação epitelial e vêm sendo investigadas na patobiologia gastrointestinal, inclusive em contextos de comprometimento da barreira e tumorigenese.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Myosin Ia (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Myo1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Myo1a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Myo1a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Myosin Ia.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Myo1a para a investigação da sinalização de Myosin Ia, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Myo1a críticos para a função Myosin Ia
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Myo1a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Myosin Ia Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Myosin Ia Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Myo1a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Myosin Ia Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Myosin Ia (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Myo1a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Myo1a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.