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Myocardin慢病毒激活颗粒(m) | sc-431931-LAC | 200 µl | $455.00 |
Myocd 编码肌心蛋白(myocardin),是一种强效的转录共激活因子,可与血清反应因子(SRF)协同作用,调控平滑肌与心肌的基因表达程序,包括收缩与细胞骨架相关组分。肌心蛋白通过整合来自肌动蛋白动力学以及 RhoA/MRTF 相关通路的信号,帮助协调肌源性分化、血管平滑肌成熟,并维持收缩表型。MYOCD 活性失调与异常血管重塑和平滑肌可塑性改变有关,因此在心血管发育研究及疾病相关基因表达改变的研究中具有重要意义。因此,小鼠肌心蛋白常被广泛用作研究肌肉谱系身份的转录调控与应激反应性重塑网络的模型。
Myocardin 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Myocd 表达。
Myocardin 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Myocd转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Myocardin表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Myocd 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。