
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MYH10双切口酶质粒(m) | sc-429543-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MYH10双切口酶质粒(m2) | sc-429543-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Myh10 编码非肌肉肌球蛋白重链 IIB(MYH10),这是一种主要的、以肌动蛋白为基础的分子马达,可产生细胞分裂(胞质分裂)、细胞迁移以及维持组织结构所必需的收缩力。MYH10 驱动的肌动蛋白-肌球蛋白动力学通过黏着斑周转以及 RhoA/ROCK 依赖的细胞骨架重塑来调控细胞黏附与极性,将机械张力与信号输出相耦联,从而塑造形态发生。在小鼠体系中,MYH10 的活性与发育程序以及神经和心血管组织的构建密切相关;而非肌肉肌球蛋白 II 功能失调与细胞分裂缺陷、运动性改变以及与细胞外基质相互作用异常有关,这些改变与疾病相关表型具有相关性。上述特性使 Myh10 成为解析机械转导、细胞骨架组织以及力依赖性基因表达调控的一个有用节点。
MYH10 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Myh10 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Myh10内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Myh10的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Myh10基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。