MYG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405754

概要

C12orf10はMYG1をコードしており、MYG1はRNA代謝とゲノム維持に関与するとされる保存性ヌクレアーゼで、RNA基質に対する活性や、ミトコンドリアおよび核におけるRNAプロセシングでの役割が報告されています。MYG1はミトコンドリア遺伝子発現と細胞のエネルギーホメオスタシスの調節にも関連づけられており、RNA分解（ターンオーバー）、酸化的リン酸化、ストレス適応的な転写プログラムを協調させる経路と結びついています。MYG1機能が攪乱されると、RNA品質管理やオルガネラ機能が破綻しうるほか、これらの過程は疾患に関連する状況でしばしば、増殖の変化、プロテオスタシスの不均衡、炎症性シグナル伝達の亢進と関連します。これらの特徴により、MYG1はヒト細胞におけるRNAプロセシングネットワークやミトコンドリア—核間コミュニケーションの機構研究に有用な標的となります。

MYG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるC12orf10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、C12orf10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、C12orf10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MYG1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MYG1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、C12orf10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MYG1の機能に不可欠なC12orf10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、C12orf10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MYG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMYG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、C12orf10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MYG1 HDRプラスミド（h）および MYG1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはC12orf10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のC12orf10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。