c-Myc Nickase 质粒 (h): sc-400001-NIC. 未转染对照 (A) 和转染 c-Myc Nickase 质粒 (B) 的 HEK293T 全细胞裂解液中 c-Myc 表达的 Western 印迹分析. 印迹探针为 c-Myc (9E10): sc-40. ß-Actin (C4): sc-47778 用作特异性和负载对照.
Myc双切口酶质粒(h): sc-400001-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Myc 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Myc双切酶质粒（h）和Myc双切酶质粒（h2）编码针对MYC的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Myc: sc-40，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Myc双切口酶质粒(h) | sc-400001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Myc双切口酶质粒(h2) | sc-400001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYC 基因编码转录因子 Myc。Myc 通过调控依赖 RNA 聚合酶 II 的转录程序，是细胞生长、代谢与增殖的核心调控因子。Myc 协调核糖体生物发生、核苷酸与氨基酸代谢、线粒体功能以及细胞周期推进，并整合来自 MAPK/ERK、PI3K/AKT 等通路的促有丝分裂信号。MYC 活性失调与致癌转化、基因组不稳定性和分化异常密切相关，因此是癌症生物学中研究最广泛的驱动因素之一。由于 Myc 会影响染色质可及性并引发转录扩增，研究中常通过扰动 MYC 来绘制基因调控网络并识别情境特异性的脆弱性。
Myc 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MYC 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MYC内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MYC的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MYC基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。