Mucin 4/MUC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431204

概要

Muc4はムチン4（MUC4）をコードしており、MUC4は高分子量でO-結合型糖鎖修飾を豊富に受けた膜貫通型ムチンです。上皮表面の保護、保湿、潤滑に寄与します。伸長した細胞外ドメインと細胞表面での局在を介して、MUC4は細胞―細胞間および細胞―細胞外マトリックス間の相互作用に影響を与え、バリア機能を調節し、受容体近傍のシグナル伝達や、増殖・接着・遊走に関与する下流経路にも影響し得ます。マウス組織では、Muc4の発現は粘膜上皮や分泌プログラムと関連し、グリコカリックスの形成に関わる糖鎖付加や膜輸送プロセスと連動しています。ムチン発現の異常や糖鎖修飾の変化は、炎症、上皮リモデリング、ならびに腫瘍に伴う接着・シグナル伝達の変化との関連でしばしば研究されています。

Mucin 4/MUC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMuc4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Muc4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Muc4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Mucin 4/MUC4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Mucin 4/MUC4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Muc4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Mucin 4/MUC4の機能に不可欠なMuc4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Muc4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Mucin 4/MUC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMucin 4/MUC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Muc4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Mucin 4/MUC4 HDRプラスミド（m）および Mucin 4/MUC4 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMuc4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMuc4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。