Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
MT-MMP-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401028-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MT-MMP-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MT-MMP-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MT-MMP-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MMP14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MT-MMP-1 Anticorpo (C-7): sc-377097
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MT-MMP-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401028-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MT-MMP-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401028-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MMP14 codifica a metaloproteinase de matriz tipo membrana 1 (MT-MMP-1), uma endopeptidase transmembranar que promove a remodelação pericelular da matriz extracelular ao clivar colagénio e outros substratos da matriz e ao ativar a pro-MMP2. Ao localizar a proteólise à superfície celular, a MT-MMP-1 coordena a migração invasiva, a dinâmica/renovação das adesões focais e a morfogénese dos tecidos por meio de sinalização ligada a integrinas e de pistas derivadas da matriz que intersetam vias como a do TGF-β e programas responsivos à hipóxia. A atividade desregulada de MMP14 tem sido associada a alterações na remodelação do estroma, aumento da motilidade celular e mudanças no microambiente angiogénico observadas em contextos fibróticos e malignos. Estas propriedades fazem de MMP14 um nó central para estudar a invasão dependente de proteases e a sinalização mediada pela matriz em modelos de células humanas.
MT-MMP-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MMP14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MMP14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MMP14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MMP14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.