Partículas Lentivirales de Activación (h) MS4A6A: sc-417401-LAC

MS4A6A codifica una proteína de membrana tipo tetraspanina de la familia membrane-spanning 4A, enriquecida en células mieloides, incluidos los monocitos y los macrófagos tisulares. Se utiliza con frecuencia como marcador de estados activados de microglía y macrófagos, y se vincula a programas de señalización inmunitaria que moldean la fagocitosis, el procesamiento/presentación de antígenos y las respuestas inflamatorias. Estudios transcriptómicos y genéticos asocian MS4A6A con la biología neuroinflamatoria y la activación microglial relacionada con la enfermedad de Alzheimer, así como con una remodelación más amplia de la inmunidad innata en contextos inflamatorios crónicos. Estas características hacen de MS4A6A un nodo útil para investigar transiciones de estado en células mieloides y procesos de señalización asociados a la membrana.

Las partículas de activación lentiviral MS4A6A (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de MS4A6A en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral MS4A6A (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción MS4A6A, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de MS4A6A. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo MS4A6A y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.