MRVI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411458

Visão geral

MRVI1 (homólogo do sítio de integração do retrovírus murino 1) codifica uma proteína citoplasmática de ancoragem (scaffold) que acopla a sinalização de óxido nítrico/cGMP à regulação do cálcio intracelular, particularmente por meio da interação com o ITPR1 e da modulação da liberação de Ca2+ dependente do receptor de IP3. Participa da via da PKG e contribui para o relaxamento do músculo liso, a função plaquetária e o controle mais amplo da dinâmica de sinalização dirigida por Ca2+. A sinalização dependente de MRVI1 afeta processos celulares como contração, secreção e excitabilidade ao ajustar a integração de segundos mensageiros no retículo endoplasmático. A desregulação das vias de Ca2+ e cGMP associadas a MRVI1 tem sido implicada em fenótipos cardiovasculares e hematológicos e é relevante para estudos mecanísticos de alterações de sinalização observadas no câncer e em outras doenças complexas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MRVI1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MRVI1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MRVI1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MRVI1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MRVI1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MRVI1 para a investigação da sinalização de MRVI1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MRVI1 críticos para a função MRVI1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MRVI1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MRVI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MRVI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MRVI1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MRVI1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MRVI1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MRVI1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MRVI1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.