MOS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406911

Visão geral

O MOS humano codifica Mos, uma proteína quinase de serina/treonina mais conhecida pelo seu papel no controlo do ciclo celular meiótico através da ativação da cascata MAPK/ERK. Mos atua a montante de MEK1/2 e ERK1/2, ajudando a coordenar a atividade do fator citostático, a dinâmica do fuso e a progressão pela fase M em contextos de células germinativas, e tem sido utilizado como um regulador modelo do feedback da sinalização MAPK. A expressão desregulada de MOS ou a atividade da sua quinase tem sido associada a alterações na sinalização proliferativa e a fenótipos semelhantes aos de transformação em sistemas experimentais, sustentando a sua relevância para o estudo da arquitetura da via MAPK e dos checkpoints do ciclo celular. Estas propriedades tornam o MOS um alvo útil para investigar redes de sinalização dependentes de quinases e os seus efeitos a jusante na transcrição e no citoesqueleto.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MOS (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MOS em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MOS, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MOS na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MOS.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MOS para a investigação da sinalização de MOS, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MOS críticos para a função MOS
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MOS para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MOS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MOS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MOS. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MOS Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MOS (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MOS para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MOS definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.