MLL3 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-402052-LAC

KMT2C (MLL3) codifica uma metiltransferase de lisina de histona contendo domínio SET, que catalisa principalmente a monometilação de H3K4 em enhancers, moldando a comunicação entre enhancer e promotor e o resultado transcricional. Como componente central de complexos do tipo COMPASS, a MLL3 integra sinais da cromatina para regular a especificação de linhagens, programas de diferenciação e a expressão gênica responsiva a estímulos em múltiplos contextos de sinalização. A desregulação de KMT2C é frequentemente observada em estudos genômicos de câncer e também está implicada em alterações da regulação epigenética em transtornos do desenvolvimento e neurobiológicos, refletindo seu papel na manutenção da homeostase transcricional. Essas propriedades fazem da MLL3 um nó-chave para estudar a regulação de enhancers, a arquitetura da cromatina e o controle transcricional dependente de contexto em células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais MLL3 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de KMT2C numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais MLL3 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição KMT2C, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de MLL3. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo KMT2C e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.