MIA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418205-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MIA2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MIA2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MIA2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MIA2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MIA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418205-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MIA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418205-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MIA2 (membro 2 da família de atividade inibitória do melanoma) codifica uma grande proteína da via secretória, enriquecida no retículo endoplasmático e no Golgi, que dá suporte ao tráfego intracelular e à secreção de proteínas de carga específicas. Está implicada na homeostase do RE e no processamento proteico, conectando a atividade de MIA2 a vias como respostas ao estresse do RE, transporte mediado por vesículas e regulação de sinalização associada à matriz extracelular. Alterações na expressão de MIA2 foram relatadas em diversas neoplasias malignas e patologias hepáticas, de acordo com papéis na diferenciação de células tumorais, em mudanças do secretoma relacionadas à invasão e na remodelação do tecido hepático. Essas características tornam MIA2 um alvo útil para estudar a regulação de redes secretórias e como defeitos de tráfego influenciam fenótipos celulares.
MIA2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MIA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MIA2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MIA2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MIA2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.