mGluR-5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401460-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- mGluR-5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase mGluR-5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase mGluR-5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRM5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:mGluR-5 Anticorpo (1B3): sc-293442
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mGluR-5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401460-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mGluR-5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401460-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRM5 codifica o receptor metabotrópico humano de glutamato 5 (mGluR-5), um GPCR de classe C que se acopla principalmente a Gq/11 para ativar a fosfolipase Cβ, impulsionar a sinalização por IP3/DAG, aumentar o Ca2+ intracelular e engajar programas transcricionais dependentes de PKC e de MAPK/ERK. O mGluR-5 é enriquecido em sinapses excitatórias, onde modula a plasticidade sináptica, a excitabilidade neuronal e o tráfego de receptores, incluindo crosstalk funcional com a sinalização do receptor NMDA. Por meio dessas vias, GRM5 contribui para o desenvolvimento de circuitos e para a regulação gênica dependente de atividade, sendo frequentemente investigado no contexto de fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, bem como de suscetibilidade a crises epilépticas e de mecanismos neurodegenerativos. A modulação experimental de GRM5 é usada para dissecar redes de sinalização glutamatérgica e processos a jusante dependentes de cálcio em modelos humanos baseados em células.
mGluR-5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRM5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRM5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRM5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRM5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.