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mGluR-2双切口酶质粒(h) | sc-403054-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mGluR-2双切口酶质粒(h2) | sc-403054-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 GRM2 基因编码代谢型谷氨酸受体 mGluR-2,这是一类 C 型 GPCR,主要偶联 Gi/o 蛋白,从而抑制腺苷酸环化酶活性并调控下游 cAMP/PKA 信号通路。mGluR-2 作为突触前神经递质释放和突触可塑性的关键调控因子,通过调节离子通道以及神经递质释放机制来塑造兴奋性传递。借由这些机制,GRM2 参与维持神经网络稳态以及与学习和应激反应相关的活动依赖性信号程序。GRM2/mGluR-2 信号的异常已与神经精神及神经发育相关表型相联系,支持其用于研究谷氨酸能环路功能障碍机制的实验体系。
mGluR-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GRM2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GRM2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GRM2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GRM2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。