MGAT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427040-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MGAT1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MGAT1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase MGAT1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mogat1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MGAT1 Anticorpo (H-6): sc-376079
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MGAT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427040-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MGAT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-427040-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Mogat1 de camundongo codifica a MGAT1 (monoacilglicerol O-aciltransferase 1), uma enzima associada ao retículo endoplasmático que catalisa a conversão de monoacilglicerol em diacilglicerol dependente de acil-CoA, fornecendo substrato para a síntese de triacilglicerol. Ao regular a disponibilidade de diacilglicerol, a MGAT1 conecta programas de armazenamento lipídico a processos de sinalização influenciados por DAG, cruzando-se com vias que moldam a composição lipídica de membranas e as respostas ao estresse metabólico. A expressão de Mogat1 é proeminente em tecidos metabólicos e é frequentemente estudada em contextos de excesso de nutrientes, acúmulo de lipídios hepáticos e sensibilidade à insulina alterada, nos quais mudanças na síntese de lipídios neutros podem remodelar a homeostase celular. Essas características tornam a MGAT1 um alvo relevante para estudos mecanísticos de metabolismo lipídico, balanço energético e adaptações transcricionais a jusante em modelos murinos.
MGAT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mogat1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mogat1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mogat1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mogat1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.