MFSD2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429366-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MFSD2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MFSD2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase MFSD2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mfsd2a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MFSD2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429366-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mfsd2a codifica a MFSD2, um transportador de membrana multipasse da superfamília dos principais facilitadores, altamente enriquecido em barreiras endoteliais e que contribui para o transporte de lipídios e nutrientes através de interfaces vasculares especializadas. Em camundongos, a MFSD2A é mais conhecida por regular a transcitose no endotélio microvascular cerebral, sustentando a integridade da barreira hematoencefálica e influenciando a homeostase do SNC. Por meio de seu papel no transporte de membrana e no controle do tráfego vesicular, a MFSD2A afeta vias do metabolismo lipídico e funções de barreira celular relevantes para modelos de neurodesenvolvimento e neuroinflamação. Alterações na atividade da MFSD2A têm sido associadas a fenótipos de disfunção de barreira e a mecanismos de doenças neurológicas, tornando-a um alvo útil para estudar a biologia do transporte endotelial e a regulação metabólica relevante ao SNC.
MFSD2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mfsd2a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mfsd2a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mfsd2a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mfsd2a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.