MFSD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429366

Visão geral

Mfsd2a codifica a MFSD2, um transportador da superfamília dos grandes facilitadores (major facilitator superfamily) implicado no processamento de lipídios e na homeostase de membranas, com papéis bem estabelecidos na biologia endotelial e na fisiologia do tecido neural. Na barreira hematoencefálica, a MFSD2 contribui para a regulação da transcitose e influencia o fornecimento de lisofosfolipídios, como ácidos graxos ômega‑3 ligados à LPC, impactando assim a integridade da unidade neurovascular e a função neuronal. Alterações na atividade de MFSD2A têm sido associadas a propriedades de barreira comprometidas, fenótipos do neurodesenvolvimento e mudanças na sinalização inflamatória relacionadas ao estresse endotelial e metabólico. Em modelos murinos, Mfsd2a oferece um ponto de entrada prático para estudar a sinalização acoplada ao transporte de lipídios, o controle da permeabilidade vascular e a adaptação metabólica específica de tecidos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MFSD2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Mfsd2a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Mfsd2a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Mfsd2a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MFSD2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Mfsd2a para a investigação da sinalização de MFSD2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Mfsd2a críticos para a função MFSD2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Mfsd2a para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MFSD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MFSD2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Mfsd2a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MFSD2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MFSD2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Mfsd2a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Mfsd2a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.