Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Met Plasmide Double Nickase (m): sc-421635-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Met Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Met Double Nickase Plasmid (m) e il Met Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Met. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Met Antibody (B-2): sc-8057
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Met Plasmide Double Nickase (m) | sc-421635-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene Met del topo codifica la tirosin-chinasi recettoriale MET, recettore cognato del fattore di crescita degli epatociti (HGF) e regolatore centrale della segnalazione epitelio–mesenchimale. In seguito al legame con il ligando, l’autofosforilazione di MET avvia cascate a valle che includono le vie PI3K–AKT, RAS–MAPK, STAT e SRC/FAK, coordinando proliferazione, sopravvivenza, migrazione e morfogenesi. La segnalazione di MET contribuisce a programmi di sviluppo quali l’organogenesi e la rigenerazione tissutale, e la sua disregolazione è ampiamente studiata nel contesto della crescita invasiva e del rimodellamento delle vie oncogeniche. Nei sistemi murini, la funzione di Met viene frequentemente analizzata in modelli di progressione tumorale, interazioni stromali e biologia della riparazione delle ferite.
Met Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Met nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Met. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Met. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Met interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.