MEK-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402363

概要

MAP2K7はMEK-7（MKK7）をコードしており、これは二重特異性をもつMAPキナーゼキナーゼ（MAPKK）で、炎症性サイトカイン、酸化ストレス、遺伝毒性シグナルに応答してJNK（MAPK8/9/10）を選択的にリン酸化して活性化します。MEK-7はMAPK/JNKカスケード内で機能し、アポトーシス、分化、サイトカイン産生、細胞骨格リモデリングを制御する転写プログラムを調節します。上流のMAP3K（例：TAK1/MAP3K7、MEKK群）とのクロストークや、下流のAP-1ファミリー因子を介して、MAP2K7はストレス適応応答や自然免疫シグナル伝達の出力形成に寄与します。MAP2K7–JNKシグナルの制御異常は炎症応答の変化と関連しており、がん生物学、神経変性、代謝ストレスモデルなどの文脈で研究されています。

MEK-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMAP2K7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MAP2K7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MAP2K7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MEK-7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MEK-7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MAP2K7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MEK-7の機能に不可欠なMAP2K7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MAP2K7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MEK-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMEK-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MAP2K7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MEK-7 HDRプラスミド（h）および MEK-7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMAP2K7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMAP2K7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。