Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
mEH Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404239-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- mEHO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase mEH (h) e o Plasmídeo Double Nickase mEH (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EPHX1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:mEH Anticorpo (17): sc-135984
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mEH Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404239-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mEH Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404239-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O EPHX1 humano codifica a epóxido-hidrolase microssomal (mEH), uma enzima associada ao retículo endoplasmático que hidrolisa epóxidos reativos em dióis menos reativos e, assim, molda a forma como a célula lida com xenobióticos e com epóxidos lipídicos endógenos. A mEH participa de redes metabólicas de fase I/II que se cruzam com respostas ao estresse oxidativo, a homeostase redox e a sinalização inflamatória, influenciando vias a jusante relacionadas à capacidade de desintoxicação. Variações na atividade de EPHX1 são estudadas no contexto de suscetibilidade diferencial a exposições químicas e da modulação de intermediários epóxidos bioativos. Na pesquisa biomédica, o EPHX1 é frequentemente investigado pelo seu impacto no fenótipo metabólico, na tolerância celular ao estresse e na interação entre vias que afetam a sinalização de mediadores lipídicos.
mEH O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EPHX1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EPHX1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EPHX1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EPHX1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.