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MCT1双切口酶质粒(h) | sc-400363-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCT1双切口酶质粒(h2) | sc-400363-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC16A1 编码单羧酸转运蛋白 1(MCT1),这是一种与质子偶联的质膜同向转运体,可介导乳酸、丙酮酸和酮体跨细胞膜的双向转运。MCT1 通过将单羧酸通量与质子梯度相耦联,调控细胞内 pH、氧化还原平衡,以及糖酵解细胞与氧化代谢细胞之间的代谢串扰,从而影响糖酵解、氧化磷酸化及缺氧相关的代谢适应等通路。MCT1 的功能还与伴侣蛋白依赖的膜转运与膜上稳定性整合在一起(如 CD147/BSG),进而影响代谢活跃组织中的底物可用性与信号传导。SLC16A1 的表达或活性异常与乳酸处理和能量代谢失衡有关,见于肿瘤生物学、骨骼肌生理以及神经系统相关情境,因此是研究代谢重编程机制的重要靶点。
MCT1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SLC16A1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SLC16A1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SLC16A1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SLC16A1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。