MCP-2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422848

개요

마우스 Ccl8는 단핵구 유인 단백질-2(MCP-2)를 암호화하며, MCP-2는 CCR1, CCR2, CCR5와 같은 케모카인 수용체를 통해 신호를 전달함으로써 백혈구 이동(트래픽킹)을 조율하는 CC 케모카인이다. MCP-2는 염증성 케모택시스를 형성하고, 골수계 세포의 유입을 조절하며, 손상되거나 감염된 조직 내에서 선천면역과 적응면역 구획 간의 상호작용에 기여한다. Ccl8 발현은 흔히 NF-κB 및 사이토카인에 의해 유도되는 프로그램의 하위에서 유도되어, 패턴 인식 및 염증 신호 전달을 세포 이동과 연결한다. MCP-2 활성의 조절 이상은 만성 염증 상태, 자가면역성 표현형, 종양 연관 면역 침윤과 관련된 것으로 보고되어, 면역 미세환경의 기전 연구에서 중요한 표적이다.

MCP-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ccl8 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ccl8 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ccl8의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MCP-2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MCP-2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ccl8 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MCP-2 기능에 중요한 Ccl8 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ccl8 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MCP-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MCP-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ccl8 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MCP-2 HDR 플라스미드 (m) 및 MCP-2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ccl8 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ccl8 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.