Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MCAD Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402708-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MCADO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MCAD (h) e o Plasmídeo Double Nickase MCAD (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACADM. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MCAD Anticorpo (E-8): sc-271931
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MCAD Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402708-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCAD Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402708-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACADM codifica a acil-CoA desidrogenase de cadeia média (MCAD), uma flavoproteína mitocondrial que catalisa a primeira etapa de desidrogenação de acil-CoAs de ácidos graxos de cadeia média durante a β-oxidação. A atividade da MCAD sustenta a produção de energia a partir de ácidos graxos, contribuindo para a flexibilidade metabólica durante o jejum e outros estados de alta demanda, e se integra ao equilíbrio redox mitocondrial mais amplo e ao suprimento de acetil-CoA. A disfunção de ACADM está associada à oxidação prejudicada de ácidos graxos e ao acúmulo de acilcarnitinas de cadeia média, uma assinatura bioquímica amplamente utilizada em pesquisa metabólica. Assim, ACADM/MCAD é um ponto-chave para o estudo do metabolismo mitocondrial, do sensoriamento de nutrientes e da sinalização derivada de lipídios em modelos celulares humanos.
MCAD O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACADM em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACADM. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACADM. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACADM interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.