Date published: 2026-7-12

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MC4-R双切口酶质粒(h): sc-417769-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • MC4-R 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • MC4-R双切酶质粒(h)和MC4-R双切酶质粒(h2)编码针对MC4R的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:MC4-R: sc-55567,通过WB, IF或者IHC分析
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    MC4-R双切口酶质粒(h)

    sc-417769-NIC
    20 µg
    $410.00

    MC4R 编码黑皮质素-4受体(melanocortin-4 receptor,MC4-R),这是一种 G 蛋白偶联受体(GPCR),可整合 α-MSH 及相关黑皮质素信号,从而调控神经系统对能量平衡与摄食行为的控制。MC4-R 主要与 Gs 蛋白偶联,激活腺苷酸环化酶,并启动依赖 cAMP/PKA 的转录程序;同时它与下丘脑的瘦素–POMC 神经环路以及更广泛的神经内分泌稳态网络相互衔接。MC4R 信号异常与食欲和体重表型失调密切相关,因此是代谢调控研究中的关键节点。在细胞与整体生物模型中,对 MC4R 的扰动常用于解析 GPCR 信号传导、受体转运/去敏化,以及与能量稳态相关的下游转录反应。

    MC4-R 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MC4R 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MC4R内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MC4R的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MC4R基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。