Plasmide Double Nickase (m) MC1-R: sc-421583-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) MC1-R correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MC1-R Double Nickase (m) et le plasmide MC1-R Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Mc1r. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) MC1-R | sc-421583-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) MC1-R | sc-421583-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mc1r de souris code le récepteur 1 de la mélanocortine (MC1‑R), un récepteur couplé aux protéines G (RCPG) qui régule la différenciation des mélanocytes et le basculement de la production de pigments en réponse à des ligands mélanocortines tels que l’α‑MSH. MC1‑R signale principalement via les voies cAMP/PKA dépendantes de Gαs, influençant des programmes transcriptionnels dépendants de MITF, la synthèse de mélanine et les réponses cellulaires au stress induit par les UV. Des variations génétiques ou une expression altérée de MC1‑R sont associées à des modifications de la couleur du pelage et des phénotypes de pigmentation chez la souris, et sont largement pertinentes pour l’étude de la biologie des mélanocytes et du stress oxydant associé aux pigments. En tant que nœud de voie intégrant la signalisation des mélanocortines au contrôle transcriptionnel de la mélanogenèse, MC1‑R constitue une cible abordable pour disséquer la signalisation des RCPG dans les cellules pigmentaires.
MC1-R Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Mc1r dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Mc1r. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Mc1r. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Mc1r.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.