mAChR M5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402943

개요

CHRM5는 무스카린성 아세틸콜린 수용체 M5(mAChR M5)를 암호화하며, 이는 주로 Gq/11에 결합하는 G 단백질 결합 수용체(GPCR)로서 포스포리파아제 C(PLC) 신호전달, 이노시톨 인산 생성, 세포내 Ca2+ 동원, 그리고 PKC 의존성 경로를 활성화합니다. 이러한 2차 전달자 연쇄반응을 통해 mAChR M5는 신경세포 흥분성, 시냅스 신호전달, 혈관 긴장도를 조절하고, MAPK/ERK 신호전달을 동원하여 유전자 발현 프로그램에 하위 효과를 유도할 수 있습니다. CHRM5는 제한된 신경 및 말초 세포 집단에서 발현되며, 이들에서 콜린성 조절은 도파민성 회로 및 신경혈관 조절과 교차합니다. 무스카린성 신호전달의 이상 조절은 신경정신과적 및 신경학적 표현형과 연관된 것으로 보고되어 왔으며, 질환 관련 세포 과정에 대한 콜린성 경로의 기여를 규명하기 위해 CHRM5 교란 모델을 활용하는 근거를 뒷받침합니다.

mAChR M5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CHRM5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CHRM5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CHRM5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 mAChR M5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 mAChR M5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CHRM5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• mAChR M5 기능에 중요한 CHRM5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CHRM5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• mAChR M5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 mAChR M5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CHRM5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  mAChR M5 HDR 플라스미드 (h) 및 mAChR M5 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CHRM5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CHRM5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.