LTA4H Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404695-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LTA4HO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LTA4H (h) e o Plasmídeo Double Nickase LTA4H (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LTA4H. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LTA4H Anticorpo (D-6): sc-390567
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LTA4H Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404695-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LTA4H Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404695-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A LTA4H (hidrolase do leucotrieno A4) humana é uma metaloenzima bifuncional dependente de zinco que converte o leucotrieno A4 em leucotrieno B4, um potente mediador lipídico que amplifica a quimiotaxia, a sinalização por citocinas e a ativação da imunidade inata. Por meio da via do ácido araquidônico e da biossíntese de leucotrienos, a LTA4H molda o recrutamento de células inflamatórias e contribui para o equilíbrio entre respostas pró-resolução e pró-inflamatórias. A atividade desregulada da LTA4H e a sinalização por LTB4 têm sido implicadas em condições inflamatórias crônicas e em lesão tecidual mediada pelo sistema imune, sendo frequentemente estudadas no contexto de inflamação pulmonar, cardiovascular e metabólica. Como enzima citosólica com efeitos amplos sobre o comportamento de leucócitos, a LTA4H é um ponto útil para dissecar redes de sinalização dirigidas por eicosanoides e fenótipos ligados à inflamação em modelos de células humanas.
LTA4H O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LTA4H em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LTA4H. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LTA4H. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LTA4H interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.