Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LSD1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430289-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LSD1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LSD1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase LSD1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Kdm1a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LSD1 Anticorpo (B-9): sc-271720
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LSD1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LSD1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-430289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Kdm1a de camundongo codifica a desmetilase de lisina específica 1 (LSD1), uma enzima de cromatina dependente de FAD que remove marcas de mono- e dimetilação de H3K4 e, em certos contextos, de H3K9. Por meio de interações com CoREST/HDAC e outros complexos correpressores de transcrição, a LSD1 coordena estados de enhancers e promotores que controlam o compromisso de linhagem, programas do ciclo celular e a diferenciação. A atividade da LSD1 conecta o remodelamento epigenético a redes de sinalização e transcrição que regem a manutenção de células-tronco, a expressão gênica no neurodesenvolvimento e a maturação de células imunes. A desregulação da repressão ou ativação de cromatina dependente de LSD1 tem sido associada à proliferação aberrante e a estados de diferenciação alterados em múltiplos modelos biológicos relevantes para doenças, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas de epigenética.
LSD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Kdm1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Kdm1a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Kdm1a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Kdm1a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.