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LOXL1双切口酶质粒(h) | sc-401965-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LOXL1双切口酶质粒(h2) | sc-401965-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LOXL1 编码赖氨酰氧化酶样蛋白 1(lysyl oxidase–like 1),是一种依赖铜离子的胺氧化酶,可催化弹性蛋白与胶原蛋白中赖氨酸残基的氧化脱胺反应,促进细胞外基质的共价交联与成熟。通过调控弹性纤维生成(elastogenesis)和胶原原纤维形成(collagen fibrillogenesis),LOXL1 参与维持组织的力学稳定性、细胞—基质信号传导,以及与创伤修复和纤维化相关通路相联系的重塑过程。LOXL1 活性或表达的改变,与剥脱综合征/剥脱性青光眼等疾病中观察到的细胞外基质失衡,以及结缔组织重塑相关表型有关。在肿瘤生物学与肿瘤基质研究中,LOXL1 因其在基质组织结构中的作用及其对有利于侵袭的微环境可能产生的影响而受到关注。
LOXL1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LOXL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LOXL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LOXL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LOXL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。