Plásmido Doble Nickase (h) LOC100129480: sc-418668-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LOC100129480 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LOC100129480 (h) y el plásmido de doble nickasa LOC100129480 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MKRN2OS. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LOC100129480 | sc-418668-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) LOC100129480 | sc-418668-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MKRN2OS (humano) es un transcrito antisentido/superpuesto asociado al locus LOC100129480 y se espera que participe en la regulación específica del locus de la expresión génica mediante mecanismos mediados por ARN, como la interferencia transcripcional, la modulación de la cromatina o el control de la estabilidad del ARN. El producto proteico anotado LOC100129480 sigue estando poco caracterizado, pero su contexto genómico sugiere posibles vínculos con la señalización relacionada con la ubiquitina y la regulación postranscripcional, que pueden influir en decisiones del estado celular, incluida la proliferación, las respuestas al estrés y la diferenciación. La desregulación de la transcripción antisentido y de las redes de ARN no codificantes se observa con frecuencia en el cáncer y otras enfermedades complejas, lo que convierte a MKRN2OS/LOC100129480 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de la regulación génica en loci bidireccionales o superpuestos. La evaluación funcional puede ayudar a aclarar cómo este locus afecta el procesamiento de ARN, las vías asociadas a la proteostasis y los programas transcripcionales posteriores en modelos celulares humanos relevantes.
LOC100129480 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MKRN2OS en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MKRN2OS. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MKRN2OS. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MKRN2OS alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.