LMTK3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403191

Visão geral

LMTK3 (quinase de tirosina de lêmure 3) codifica uma quinase de serina/treonina associada à membrana, implicada na regulação de vias de sinalização intracelular e de tráfego vesicular que influenciam a renovação de receptores e a duração do sinal. Em contextos epiteliais, a LMTK3 tem sido associada à modulação de programas transcricionais conduzidos por quinases e à comunicação cruzada com a sinalização de receptores hormonais, moldando a proliferação celular e as respostas ao estresse. Alterações na expressão ou na atividade de LMTK3 foram relatadas em múltiplos cenários relevantes para o câncer, nos quais ela é estudada pelo impacto na responsividade a fatores de crescimento, na sinalização de sobrevivência e em fenótipos de resistência associados à terapia. Como resultado, a LMTK3 é um alvo útil para dissecar a arquitetura de redes de quinases, a dinâmica do sistema endomembranar e os outputs transcricionais a jusante em sistemas modelo humanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LMTK3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LMTK3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LMTK3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LMTK3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LMTK3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LMTK3 para a investigação da sinalização de LMTK3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LMTK3 críticos para a função LMTK3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LMTK3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LMTK3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LMTK3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LMTK3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LMTK3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LMTK3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LMTK3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LMTK3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.