Plasmide CRISPR/Cas9 KO LMO2 (m): sc-421447
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- LMO2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique LMO2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LMO2 Antibody (1A9-1): sc-65736
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO LMO2 (m) | sc-421447 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Lmo2 code pour LIM domain only 2 (LMO2), une protéine adaptatrice nucléaire qui assemble des complexes transcriptionnels multiprotéiques contrôlant la spécification de lignée et la différenciation, en particulier dans les compartiments hématopoïétique et endothélial. En faisant le lien entre des facteurs de transcription se liant à l’ADN et des cofacteurs, LMO2 influence des programmes associés au maintien des cellules souches/progénitrices, à l’expression de gènes angiogéniques et au développement érythroïde. Une expression dérégulée de LMO2 ou une composition altérée des complexes est associée à une hématopoïèse anormale et à des états transcriptionnels oncogéniques, ce qui en fait une cible fréquente dans les études de la leucémogenèse et de la biologie vasculaire. Les modèles murins de Lmo2 sont donc largement utilisés pour disséquer l’architecture des réseaux transcriptionnels, la régulation dépendante des enhancers et les décisions de destin développemental.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO LMO2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Lmo2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Lmo2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Lmo2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine LMO2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Lmo2 pour l'étude de la signalisation de LMO2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Lmo2 essentiels à la fonction de LMO2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Lmo2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le LMO2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le LMO2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Lmo2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le LMO2 plasmide HDR (m) et le LMO2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Lmo2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Lmo2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.