LKB1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400313

概要

STK11 はセリン／スレオニンキナーゼである LKB1 をコードしており、AMPK および関連する AMPK ファミリーキナーゼをリン酸化することで、細胞のエネルギー恒常性と極性を制御するマスター調節因子として機能します。LKB1 は栄養状態やストレスのシグナルを統合し、mTOR シグナル伝達、オートファジー、ミトコンドリア代謝、細胞周期制御に影響を及ぼすとともに、極性複合体を介して上皮の組織化にも寄与します。LKB1 依存的シグナルの破綻は、代謝適応の変化、極性の障害、ゲノムストレス応答の異常と関連します。STK11 はがん生物学および遺伝性腫瘍素因の文脈で頻繁に研究されており、LKB1 機能の喪失は増殖制御と代謝経路を再編します。

LKB1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSTK11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、STK11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、STK11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LKB1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LKB1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、STK11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LKB1の機能に不可欠なSTK11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、STK11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LKB1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLKB1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、STK11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LKB1 HDRプラスミド（h）および LKB1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSTK11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSTK11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。