LHX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401071
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- LHX2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico LHX2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LHX2 Anticuerpo (LHX2A12G1): sc-81311
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
LHX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401071 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
LHX2 (LIM homeobox 2) codifica un factor de transcripción con dominio LIM que regula la especificación de linaje y el patrón tisular durante el desarrollo, con funciones destacadas en el mantenimiento de progenitores neurales, la arealización cortical y la morfogénesis del folículo piloso. Al unirse a cofactores LIM y a elementos de ADN específicos de secuencia, LHX2 coordina programas transcripcionales vinculados a decisiones de destino celular, al momento de la diferenciación y a redes de señalización sensibles a morfógenos, como el patrón dependiente de WNT y SHH. La actividad desregulada de LHX2 se ha asociado con trayectorias neurodesarrollativas alteradas y con estados transcripcionales aberrantes observados en múltiples contextos de cáncer. Como regulador nuclear, LHX2 constituye un nodo útil para desentrañar circuitos de regulación génica que acoplan programas del desarrollo con fenotipos de proliferación y diferenciación en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO LHX2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LHX2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LHX2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LHX2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LHX2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LHX2 para la investigación de la señalización de LHX2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de LHX2 críticos para la función de LHX2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LHX2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido LHX2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LHX2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LHX2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LHX2 (h) y el plásmido HDR LHX2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LHX2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LHX2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.