LHX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401071

概要

LHX2（LIM homeobox 2）は、LIMドメインをもつ転写因子をコードしており、発生過程における系譜指定や組織パターニングを制御します。とりわけ、神経前駆細胞の維持、大脳皮質の領域化（arealization）、および毛包形態形成において重要な役割を担います。LHX2はLIM共因子および配列特異的なDNA配列に結合することで、細胞運命決定、分化のタイミング、さらにWNTやSHH依存的なパターニングなどのモルフォゲン応答性シグナルネットワークに関連する転写プログラムを統合的に制御します。LHX2活性の破綻は、神経発生の進行経路の変化や、複数のがんにおいて観察される異常な転写状態と関連づけられています。核内の制御因子として、LHX2は、発生プログラムとヒト細胞における増殖・分化表現型を結びつける遺伝子制御回路を解析するうえで有用な結節点となります。

LHX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLHX2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LHX2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LHX2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LHX2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LHX2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LHX2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LHX2の機能に不可欠なLHX2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LHX2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LHX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLHX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LHX2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LHX2 HDRプラスミド（h）および LHX2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLHX2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLHX2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。