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LHX1慢病毒激活颗粒(h) | sc-403100-LAC | 200 µl | $455.00 |
LHX1(LIM 同源盒 1)编码一种含 LIM 结构域的转录因子,可将 DNA 结合与辅因子募集整合起来,从而调控发育相关的基因调控网络。它通过协调形态发生素通路(如 WNT、BMP 和 FGF 信号)下游的转录模块,参与细胞命运决定与组织模式化等程序,其中包括与早期胚胎发生和器官发生相关的过程。在人类生物学中,LHX1 调控异常与先天性发育异常有关,并在人类谱系身份与分化状态发生失调的研究背景中受到关注。作为核内转录调控因子,LHX1 常被用作发育信号、转录调控回路以及谱系重编程研究中的标志物和功能节点。
LHX1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 LHX1 表达。
LHX1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在LHX1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性LHX1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 LHX1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。