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LGR4慢病毒激活颗粒(m) | sc-430724-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Lgr4 编码含亮氨酸富集重复序列的 G 蛋白偶联受体 LGR4,它是 R-spondin 增强的 Wnt/β-连环蛋白信号及其相关转录程序的关键调控因子,这些程序负责干细胞/祖细胞维持、上皮更新与器官发生。LGR4 在多个组织区室中影响细胞命运决定、分化与组织稳态,包括肠道、乳腺、肾脏、骨骼以及生殖组织。LGR4 信号改变与增殖失衡和发育缺陷有关;由于 Wnt 通路的精细调节至关重要,LGR4 也常在肿瘤生物学、代谢以及炎症微环境等研究背景中被深入探讨。
LGR4 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Lgr4 表达。
LGR4 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Lgr4转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性LGR4表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Lgr4 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。